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PCR试剂有哪几类,怎样区分
PCR试剂有哪几类,怎样区分
1.提取试剂,包括了各种提取dna的常用试剂,和纯化dna所用的试剂
2.pcr扩增试剂:主要是taq酶,dntp(四种碱基),缓冲试剂(buffer),引物
3.产物检测试剂:琼脂糖,聚丙烯酰胺凝胶,aps,tmed,eb等等吧
pcr试剂没混匀会影响结果吗
会影响。
因为pcr的过程中是要检测各个位点的特异荧光强度的,如果在pcr前不进行充分的混匀离心,一是反应试剂的量可能各不一样,均一性不好,影响荧光强度;二是如果有气泡的话,会对荧光有所折射,反射等情况发生,同时也会阻碍光路通路。综上,pcr前需要充分混匀,离心,最好不要有气泡。
pcr试剂盒的性能质检主要包括
测量正确度。
pcr试剂盒的性能质检主要包括测量正确度,测量精密度(含测量重复性和测量中间精密度),测量不确定度,分析特异性(含抗干扰能力),分析灵敏度,检出限和定量限,线性区间(可报告区间)等。PCR定性检测选择验证的性能指标宜包括方法符合率,检出限,抗干扰能力,交叉反应等。
PCR方法已广泛用于科研,在工业中也有不断扩大应用的趋势,它包括检测一些病原体,检测支原体污染,检测细菌污染以及检测残留宿主DNA等。
执业药师考试章节知识点归纳,祝你轻松取证。
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pcr扩增用的试剂有哪些?
pcr扩增所用的试剂:
pcr扩增步骤:
1.细菌染色体DNA的提取(见上一组)
2.RAPD反应体系的配置(上图)
3·反应程序:将RAPD反应试剂加入EP管中 轻混后用100ul石蜡油覆盖于反应混合液之上,防止样品在反复加热-冷却的过程中蒸发,盖好盖子。
打开PCR反应仪输入以下反应数据
· 94 摄氏度预变性5min
· 94摄氏度变性40s
· 40摄氏度退火40s
· 72摄氏度延伸1min
将EP管放入仪器开始扩增,循环35次;72摄氏度延伸10min
注意事项:
1、PCR反应体系中DNA样品及各种试剂的用量都极少,必须严格注意吸样量的准确性及全部放入反应体系中。
2、为避免污染凡是用在PCR反应中的Tip尖、离心管、蒸馏水都要灭菌;吸每种试剂时都要换新的灭菌Tip尖。
3、加试剂时先加消毒三蒸水,最后加DNA模板和Taq DNA聚合酶。
4、置PCR仪进行PCR反应前,PCR管要盖紧,否则使液体蒸发影响PCR反应。
5、引物条件首先引物与模板的序列要紧密互补,其次引物与引物之间避免形成稳定二聚体或发夹结构,再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应(即错配)。
PCR实验都需要什么试剂啊?
需要1 缓冲液(分为含二价Mg和不含的,不含的就还要MgCl2)
2 dNTP
3 引物
4 模板
5 酶
如果你买MIX的话,就只需要MIX,模板以及引物。